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    【新品】不拖尾的安全核酸染料          新品推荐(第二件半价):无需固定破膜的活细胞周期试剂盒

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UE凋亡检测试剂盒,无需调补偿,助您轻松做流式!

发布时间:2019/10/16 点击次数:713 来源:US Everbright Inc.

产品目录:

货号
产品名称 规格 目录价(RMB)
A6079-20T
Annexin V-PE and RedNucleus Ⅱ Apoptosis Kit
20T
900
A6079-50T
50T 1900
A6079-100T
100T 2800

实验原理:

Annexin V 是一类广泛分布于真核细胞胞浆的钙离子依赖性的磷脂结合蛋白。Annexin V 则选择性的结合磷脂酰丝氨酸(Phosphatidylserine, PS),PS 在细胞正常状态下是分布于细胞磷脂层内侧, 即靠近细胞质,当细胞处于早期凋亡阶段, PS 会从细胞内侧翻转至细胞外侧, 此时 Annexin V 可以与 PS 结合, 被红色荧光染料 PE 标记的 Annexin V 作为探针则会在一定波长激发的情况下检测出处于早期凋亡状态的细胞。 对于坏死细胞, 由于细胞完整性已经被破坏,Annexin V-PE 则可以进入胞浆与处于磷脂层内侧的 PS 结合,从而也使坏死细胞呈现红色荧光。

本试剂盒中提供的 RedNucleus II 是一种远红光染料,属于蒽醌类化合物, 不能透过活细胞和早期凋亡细胞完整的细胞膜, 是非渗透性的, 但是可以快速染色死亡和透化细胞中的细胞核/dsDNA。 RedNucleus II 是一种理想的碘化丙啶( PI ) 和 7-AAD 的替代物,与 PE 联用,无需补偿调节,具有更好的光谱特性:不受紫外线的激发,也不与PE/PE同系物重叠发射,故可以和 FITC,PE及紫色荧光染料结合用于多色分析。与Annexin V-PE 联用时,RedNucleus II 被排除在活细胞和早期凋亡细胞外,而晚期凋亡细胞和死细胞则同时被Annexin V-PE 和 RedNucleus II 结合染色呈现双阳性。

产品特点:

(1)RedNucleus II与PE联用,无需调节补偿

(2)RedNucleus II从488-647nm都可被激发

(3)RedNucleus II是PI和7-AAD的理想替代品,具有更好的光谱特性:无紫外激发,与PE和同系物无发射重叠

(4) 快速染色DEAD或透化细胞的dsDNA /细胞核

流式检测:

PE

7-AAD

RedNucleus II

PE

100

46.5

0.42

7-AAD

0.40

100

——

RedNucleus II

0.00

——

100

表1 不同染料单染管的补偿值

结论:用RedNucleus II代替7-AAD与PE联用时,分群效果没有明显差异,但荧光补偿值极低,几乎不用设置单染管进行荧光补偿。

使用注意事项:

1.荧光染料均存在淬灭问题, 保存和使用过程中请尽量注意避光, 以减缓荧光淬灭。

2.试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。

3.由于细胞凋亡是一个快速的过程,建议样品在染色后1 h内进行分析。

4.用胰蛋白酶进行贴壁细胞消化时,使细胞在最佳细胞培养条件和培养基中恢复约30分钟, 然后再染色。 胰蛋白酶消化会暂时破坏质膜,允许Annexin V结合磷脂酰丝氨酸在细胞膜的细胞质表面上,从而导致假阳性染色。

5.坏质膜,允许 Annexin V 结合磷脂酰丝氨酸在细胞膜的细胞

6.质表面上,从而导致假阳性染色。

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